蛋白質(zhì)沉淀的方法有那些
沉淀蛋白質(zhì)的方法主要有:鹽析、有機(jī)溶劑、生物堿試劑、重金屬鹽、加熱凝固。
分析如下:
(1)鹽析破壞蛋白質(zhì)的水化膜和電荷,采用不同濃度鹽可將不同的蛋白質(zhì)分段析出,鹽析的蛋白質(zhì)不變性,鹽析作用是可逆的。(2)有機(jī)溶劑可破壞蛋白質(zhì)的水化膜,若調(diào)節(jié)pH=pI,則更易沉淀。低溫操作,快速分離溶劑不會(huì)使蛋白質(zhì)變性,而常溫操作,蛋白質(zhì)易變性。(3)沉淀生物堿試劑:鎢酸、三氯乙酸等的酸根與帶正電荷的蛋白質(zhì)結(jié)合沉淀,會(huì)使蛋白質(zhì)變性。(4)重金屬離子可與帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)結(jié)合沉淀,會(huì)使蛋白質(zhì)變性。(5)在等電點(diǎn)加熱蛋白質(zhì)可形成凝塊沉淀,會(huì)使蛋白質(zhì)變性。
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